Utilidad de la resonancia magnética cardíaca en pacientes con distrofias neuromusculares (distrofia neuromuscular de Duchene/ Becker) / Usefulness of Cardiac Magnetic Resonance Imaging in Patients with Neuromuscular Dystrophies (Duchenne/Becker Muscular Dystrophy)

RESUMEN Introducción: La Resonancia Magnética Cardíaca (RMC) es cada vez más frecuentemente utilizada en pacientes con Distrofia Neuromuscular de Duchene y Becker (DMD y DMB). Por la capacidad de demostrar realce tardío con gadolinio (RTG), que identifica zonas de fibrosis de la pared media y subepicárdica, subendocárdica o global, y el cálculo de la fracción de eyección ventricular izquierda (FEVI), se considera el patrón oro en el diagnóstico y pronóstico de la afección cardíaca de estas distrofias. Objetivos: Determinar por medio de RMC la presencia de fibrosis cardíaca en pacientes con distrofia neuromuscular. Determinar el compromiso neuromuscular y cardiaco. Definir la evolución cardiovascular de estos pacientes Material y métodos: Se realizó un estudio descriptivo de corte transversal de 16 pacientes consecutivos desde marzo de 2021 a julio de 2022 en el Área de imagen cardiaca de CEMET (Centro Médico Tafi Viejo) y Diagnóstico Médico Dr. Gaya de la provincia de Tucumán. Resultados: Se evaluaron 16 pacientes, todos con diagnóstico confirmado de DMD/DMB por laboratorio, enzimas, y test genéticos. La edad promedio fue 19 años. Todos tenían estadio grave de la escala de Vignos y tratamiento neurológico. Todos tenían tratamiento con betabloqueantes o inhibidores de la enzima de conversión de la angiotensina. La RMC evidenció que 4 pacientes tenían deterioro grave de la FEVI (<35%); 8 pacientes tenían trastornos segmentarios o globales de la motilidad parietal del VI y en 12 se observó RTG, de distribución variable: difusa, mesocárdica, subendocárdica y subepicárdica. En 6 pacientes se observó miocardio no compacto y en 2 derrame pericárdico leve. Conclusión: La RMC debe ser incluida como método de cribaje para pacientes con distrofias neuromusculares. Su aporte para la estadificación clínica y terapéutica es de suma importancia.

ABSTRACT Introduction: Cardiac magnetic resonance imaging (CMR) is commonly used in patients with Duchene (DMD) and Becker (DMB) Neuromuscular Dystrophies. Late gadolinium enhancement (LGE) identifies areas of middle, subepicardial, or subendocardial wall fibrosis, and volumetric left ventricular ejection fraction (LVEF) is considered the gold standard in the diagnosis and prognosis of these dystrophies. Myocardial fibrosis occurs in patients with neuromuscular dystrophies. The purposes of our study were to determine the presence of cardiac fibrosis using CMR, to determine neuromuscular and cardiac involvement, and to evaluate the cardiovascular outcomes of these patients. Methods: A descriptive cross-sectional study of 16 consecutive patients was conducted from March 2021 to July 2022 in the Cardiac Imaging Service of Diagnóstico Médico and CEMET- Tucumán. Results: A total of 16 patients were evaluated, 100% of them with confirmed diagnosis of DMD/DMB by laboratory, enzymes and genetic tests. Mean age was 19 years. All patients had severe stage of the Vignos Scale and were under neurological treatment. All patients were also treated with beta-blockers or angiotensin-converting enzyme inhibitors. CMR revealed severe LVEF impairment <35% in 4 patients, segmental or global left ventricular (LV) wall motion disorders in 8 patients, and variable distribution pattern (diffuse, mesocardial, subendocardial and subepicardial patterns) of LGE in 12 patients. Non-compacted myocardium was observed in 6, and mild pericardial effusions in 2 patients. Conclusion: CMR should be included as a screening method in patients with neuromuscular dystrophies. Its contribution to clinical, echocardiographic and therapeutic staging is of utmost importance.

Ultrastructural and cytochemical changes in the liver of primary biliary cirrhosis patients

The aim of this paper is to establish whether there are cytochemical or ultrastructural alterations in the hepatocytes of patients with primary biliary cirrhosis (PBC) at stages I and II compared with the biopsies from individuals with normal liver. Cytochemical technique with ATP as substrate, transmission electron microscopy (TEM) and freeze fracture were used for the studies. In the normal liver biopsies the ultrastructural cytochemical localization of the enzymatic activity was clearly shown in the bile canaliculi. In the PBC biopsies, the enzymatic activity is increased in the bile canaliculi and is also present in the lateral membranes of the hepatocyte. TEM of the lateral surface of the hepatocyte in normal livers showed a smooth surface without microvilli but in PBC livers a large number of microvilli were seen in the lateral membranes. The Golgi apparatus in these patients was localized not only near the canaliculi (normal livers) but also in front of the microvilli. Freeze-fracture showed normal features in the bile canaliculus junctions of the PBC patients. We suggest that the localization of the enzymatic reaction, microvilli and Golgi apparatus at the PBC hepatocyte lateral membranes may represent a compensatory mechanism for derivation of bile flow and other components from the hepatocyte to the intercellular space.

Immunocytochemical reaction of sera from chagasic patients against trypanosoma cruzi, intestine of triatoma infestans and normal human heart

Chagas disease has been considered by some authors as an autoimmune pathology and denied by others. In this paper we present by means of immunocytochemical reactions with sera of chagasic patients, evidence in favor of the presence of similar antigens in the parasite, vector and non chagasic human heart. The immunocytochemical technique used permits the localization by electron microscopy of the antigens in the peritrophic membrane of the parasite and basement membranes of the vectorïs midgut and of the myosin band of the normal human heart. These observations support the assumption of an autoimmune response in Chagas disease.

Interaction of Trypanosoma cruzi with macrophages influence of temperature

Se estudió la interacción de macrófagos y T.cruzi cultivados in vitro a tres diferentes temperaturas. Luego de 24 horas de incubación a 29-C se observó un gran número de parásitos dentro de los macrófagos con evidencias de división celular. Estos parásitos presentaban un predominio de formas epimastihotas y algunas redondeadas (amastigotes) y movimientos lentos vistos por videomicroscopía. Se corroboró esta observación con los microscopios de luz y electrónico. No se observó evidencias de lisis en los fagosomas. A 40-C los macrófagos muestran un gran número de cuerpos residuales y vacuolas fagocíticas con parásitos digeridos. A 37-C se observó un estado intermedio con parásitos digeridos y normales. Se comprobó que estas temperaturas no afectan al macrófago en su capacidad fagocítica y digestiva. Se postula que la temperatura afecta principalmente al parásito en su resistencia a la digestión intracelular

Estudio comparativo de tres soluciones cardiopléjicas en pacientes sometidos a cirugía cardíaca / Comparative study of three cardioplegic solutions in patients submitted to cardiac surgery

Veinte pacientes operadores de cirugía de by pass aortocoronario fueron divididos en grupo I (n=7), que recibió como protección miocárdica una solución cardiopléjica standard; grupo II (n=6), que recibió una solución cardiopléjica conteniendo manitol; y grupo III (n=7) que recibió solución cardiopléjica con deferoxamina. Se tomaron biopsias de miocardio, previo al período isquémico (muestras A o preisquémicas) y a los 10 minutos de la reperfusión (muestras B o de reperfusión) las cuales fueron procesadas para quimioluminiscencia para detectar actividad de radicales libres y para microscopía electrónica con el objeto de evaluar lesión miocárdica a nivel de ultraestructura. Se observó que en el grupo I se producía un significativo aumento de los valores de quimioluminiscencia en las muestras B y ésto se asociaba con la presencia de áreas con franco edema mitocondrial. En los grupos II y III no había diferencia significativa entre las muestras A y B. Los resultados sugieren que durante la reperfusión se produce un daño miocárdico que en parte es causado por la citotoxicidad de los radicales libres del oxígeno. Se concluye además que la deferoxamina y más el manitol reducen las lesiones de reperfusión y que su mecanismo de acción sería por la capacidad antioxidante que poseen ambas sustancias

Plasma membrane changes during epididymal transit in the guinea pig spermatozoa

El presente trabajo explora en un estudio comparado los cambios que ocurrem en la membrana plasmática (MP) de espermatozoides extraídos del caput (inmaduros) comparados con los extraídos de la región caudal del epidídimo (maduros) mediante técnicas convencionales de réplicas por criofractura, TEM, SEM y morfometría. Al final del tránsito epididimario la MP del segmento principal del acrosoma adquiere una trama hexagonal. El segmento ecuatorial y su borde serrado no muestran variaciones significativas. Otro importante cambio que ocurre también al final del tránsito epididimario es el aumento de la concentración de partículas intramembranosas en la región postacrosomal. El cuello del espermatozoide maduro se adelgaza probablemente debido a la migración de la gota citoplasmática. Esta gota presenta en la fase P de la mmembrana plasmática, hileras de partículas pequeñas que en ocasiones foram conglomerados densos. La MP de la pieza media también contiene particulas intramembranosas en al fase P que aparentemente están mejor el annulus. Se presume que estas dos zonas tienen de común la fusión de la mmembrana plasmática con las estructuras subyacentes, envoltura nuclear y anillo de Jensen respectivamente. La MP de la pieza principal contiene conglomerados de grandes partículas de forma rectangular y de función desconocida que junto al "zipper" no cambian durante el transito epididimario

Nickel nitrate and K-ferrocyanide in fixative for electron microscopy as tracer of extracellular space

El agregado de nitrato de niquel al glutaraldehido o al glutaraldehido-paraformaldehido, y su posterior refijación en osmio-ferrocianuro de potasio, tiene la facultad de funcionar como trazador de espacios intercelulares y favorecer la coloración posterior. Se realizaron observaciones con el microscopio electrónico de transmisión: en testículo, músculo cardíaco estriado esquelético, riñon e hígado. La fijación se realiza por perfusión vía vacular o por inmersión en el fijador. Asimismo se logra preservación de los detalles ultraestructurales

Extracellular and membranal bound calcium on the contraction of mesenteric arteries of the rat

Después de perfundir la arteria mesentérica anterior de la rata y sus ramas con una solución de Tyrode sin Ca, que agora el Ca extracelular, es posible provocar contracciones mediante la inyección "en bolo" de Noradrenalina (NA), Adrenalina (AD), Serotonina (ST) y Vasopresina (VP). La infusión continua de NA produce un efecto vasoconstrictor sostenido cuando el líquido intersticial contiene Ca, pero declina cuando ést falta. Todos a la solución perfusora privada de Ca. Estos no se recuperan, perfundiendo una solución sin Ca, pero rápidamente si ésta lo contiene. Tanto el La3+ como el EDTA no ingresan a la célular muscular, sino que desplazan al Ca fijado al plasmalema, que pone en marcha el mecanismo contráctil. Cuando éste falta, los agonistas carecen del Ca que lleva su mensaje al interior de la célula y son, por lo tanto, inefectivos. Este Ca mensajero membranal es reemplazado por el Ca iónico extracelular, pero no por el Ca intracelular. Esta interpretación permite explicar el "efecto dual" de la NA, que postula que los efectos breves o fásicos se deberían a la liberación de Ca intracelular, mientras que los sostenidos o tónicos al ingreso de Ca extracelular. Cuando el medio no contiene Ca, los agonistas son capaces de provocar vasoconstricción a partir de Ca fijado a la membrana celular. Como éste no es repuesto, si el medio carece de Ca, las respuestas vasoconstrictoras delcina y acaban agotándose

Detection of cholesterol by digitonin in coated membranes of the Golgi complex in the guinea pig spermatid

En la face de maduración o condensación del complejo de Golgi de la espermátide de cobayo, se presentan las membranas de las cisternas densas y de las vesículas de condensación con características especiales que las diferencian del resto de las membranas del Golgi. Las membranas de la fase de condensación son más gruesas, están en su mayor parte cubiertas por una trama poligonal del tipo característico de la clathrina y tratadas con la técnica de la digitonina forman los típicos rulos y agujas del complejo digitonina-colesterol. Esta observación revela que ambos componentes - clathrina y colesterol - pueden coincidir en la misma membrana, se concentran en la cara interna del Golgi y por fusión de membranas se transfieren a la membrana externa del acrosoma

Gossypol injected in the rat epididymal fat pad inhibits epididymal sperm motility

El sitio primario de la acción antifertilidad del gossypol en la rata ocurruría a nivel del testículo y no en el epidídimo (Dai and Dong, 1978). Los experimentos realizados mediante ligaduras del epidídimo y administración oral de gossypol parecen demostrar la ausencia de efectos sobre el espermatozoide en el epidídimo. Para explorar hasta donde el gossypol es capaz de actuar sobre el espermatozoide contenido en el epidídimo, infiltramos la grasa adyacente al caput epidídimo con 100 ug de gossypol disueltos en 0,1 ml de aceite de sésamo. Se ligaron los conductos deferentes derechos de ambos lotes de ratas, control y tratadas. A las 24 horas de examinó bajo microscopía de contraste de fases y de campo oscuro la motilidad de los espermatozoides extraídos de los epidídimos controles y tratados. Los resultados indicaron una reducción significativa de la motilidad en los tratados con gossypol. La motidad de los tratados y ligados fue aún más baja que los tratados no ligados. Los controles ligados y no ligados mostraron una motilidad similar. El examen morfológico con TEM reveló una aparente hinchazón de la pieza media de los espermatozoides en los animales tratados. Concluimos que la introducción de gossypol dentro de la grasa epididimaria inhibe la motilidad de los espermatozoides contenidos en el epidídimo dentro de las 24 horas y que la morfotología de los espermatozoides parece sufrir alguna alteración

Disquinesia ciliar primitiva / Primitive ciliary dyskinesia

Se presentan cuatro casos de disquinesia ciliar primitiva estudiados clínica y funcionalmente y diagnosticados por microscopia electrónica. La susceptibilidad a las infecciones virales respiratorias, la bronquitis a repetición y la bronquiectasia fueron hallazgos comunes a los cuatro pacientes. La depuración mucociliar traqueal fue muy lenta o nula en todos los casos, así como también la nasal, salvo en el paciente que no presentaba compromisso otorrinológico. Los cuatro pacientes mostraron la misma malformación ciliar en la ultramicroscopia, consistente en la ausencia del brazo interno de dineína. Los estudios funcionales en casos semejantes son útiles para orientar el diagnóstico y el manejo clínico y para indicar la microscopia electrónica. La disquinesia ciliar primitiva aparecerá en su real prevalencia cuando se la conosca y se la sospeche en niños con rinitis, sinusitis, otitis y bronquitis a repetición

Ultrastructural and metabolic alteration in dyskinetoplastic Trypanosoma cruzi

El cultivo del Trypanosoma cruzi (agente causal de la enfermedad de Chagas; Kinetoplstidae; cepa Tulahuen) en presencia de etidio, una droga de efecto selectivos sobre el DNA mitocondrial, produjo la inhibición del crecimiento del parásito (50% con 1 µg/ml de droga) y alteraciones típicas en el DNA cinetoplástico, verificadas por microscopía electrónica. Los kinetoplastos se vuelven irregulares y erráticos en la ubicación, pierden la forma de arco y las diferencias de las membranas (densidad y crestas), la matriz se vuelve floculenta y filamentosa y el k DNA se compacta y pierde la configuración fibrilar. La espectrofotometría diferencial de los epimastigotes discinetoplásticos demostró la disminución de los citocromos aa3, b y o, mientras que el citocromo c no fue afectado. El efecto del etidio fue maximo sobre aa3; mínimo sobre o y en todos los casos proporcional a la concentración de la droga. Con 1 µg/ml de bromuro de etidio la disminución del citocromo aa3 fue de 93% (promedio de 4 determinaciones ñ E.S.). La respuesta de los epimastigotes discinetoplásticos a los inhibidores de la cadena respiratoria mitocondrial, a saber, cianuro (concentraciones hasta 200 µM), azida y antimicina fue negativa, en contraste con los epismatigotes normales, cuya respiración fue inhibida 75-85% por los mismos inhibidores. El cianuro 1-3 mM inhibió, sin embargo, la respiración endógena de los epimastigotes discineto-plasticos y también la respiración antimicina o azida-insensible de los epimastigotes normales. Resultados similares se obtuvieron con la fracción mitocondrial de T. cruzi, que contiene el citocromo o. Teniendo en cuenta esta circunstancia se postula la operación de una xidasa terminal accesoria, inhibida por el cianuro en concentraciones relativamente altas. El ácido salicihidromáxico, un inhibidor de la respiración dependiente de la oxidasa Cu-dependiente de otros tripanosomatideos, no afectó la respiración del T. cruzi normal o discinetoplástico